Cyclic-Di-GMP AssayKit Catalog Number: 200-100

Cyclic-Di-GMP AssayKit Catalog Number: 200-100

Cyclic-Di-GMP AssayKit Catalog Number: 200-100

Lucerna, Inc. 是一家生物技術工具公司，專(zhuan) 注於(yu) 開發和商業(ye) 化熒光適體(ti) (Spinach™) 技術，其目的是：1.) 提供即插即用的 RNA 成像和檢測係統作為(wei) 研究試劑，2.) 開發高- 通量篩選平台，以實現以前難以處理的目標的新藥物發現，以及 3.) 開發用於(yu) 工業(ye) 生產(chan) 應用的熒光傳(chuan) 感器。

lucernatechnologies 200-100說明書(shu)

Cyclic-di-GMP Assay

用於(yu) 測量細胞中環二鳥苷酸 (c-di-GMP) 水平的均質熒光測定。

檢測說明

環二鳥苷單磷酸 (c-di-GMP) 檢測是一種簡單的混合讀取、高選擇性、HTS 就緒檢測，用於(yu) 測量細胞中的 c-di-GMP 水平。這種均相測定可用於(yu) 檢測任何產(chan) 生 c-di-GMP 的生化或酶促反應中的 c-di-GMP，或用於(yu) 監測細胞內(nei) c-di-GMP 濃度的細胞應用。

測定原理

熒光信號的演變取決(jue) 於(yu) c-di-GMP 與(yu) 傳(chuan) 感器中 c-di-GMP 核糖開關(guan) 的初始結合。這導致菠菜TM適體(ti) 的穩定，進而結合 DFHBI-1T 以產(chan) 生熒光。可以使用 GFP/FITC 濾光片組或 482nm 激發和 505nm 發射來測量熒光。

便於(yu) 使用

c-di-GMP 檢測易於(yu) 使用且均質。隻需將您的樣品與(yu) 提供的檢測試劑一起孵育 30 分鍾，然後在帶有 FITC/GFP 濾光片或激發波長 482nm 和發射波長 505nm 的熒光讀板機上讀取樣品。

快速響應和良好的信號穩定性

c-di-GMP 傳(chuan) 感器在檢測 c-di-GMP 時會(hui) 迅速產(chan) 生信號，因此可以進行快速測量。熒光信號隨著時間的推移是穩定的，因此允許樣品的批處理模式。早在測定設置的 30 分鍾即可獲得出色的 HTS 參數，並在很長一段時間內(nei) 保持高水平。

寬動態範圍

該檢測即使在 50nM 的 c-di-GMP 下也很靈敏，並且具有寬廣的動態範圍。

選擇性

c-di-GMP 傳(chuan) 感器對 c-di-GMP 具有高度選擇性，不受常見反配體(ti) 的幹擾。

即使與(yu) 過量 500 – 1,000 倍的反配體(ti) （例如 GMP、pGpG 和 c-AMP-GMP）相比，該測定也實現了出色的 HTS 測定參數（Z 因子 >0.9）。

與(yu) 基於(yu) 細胞的檢測的兼容性

c-di-GMP 測定可用於(yu) 以均質形式測量細菌中的細胞內(nei) c-di-GMP 濃度，無需造粒、裂解或洗滌步驟。隻需用 BC 試劑補充含有細菌培養(yang) 物的測定緩衝(chong) 液，添加傳(chuan) 感器和熒光團，孵育 30 分鍾，然後在熒光閱讀器上讀取。

細菌中的 c-di-GMP 估計

表達野生型 WspR（來自銅綠 假單胞菌的二鳥苷酸環化酶）的大腸杆菌細胞用*、二甲基甲酰胺/DMF（載體(ti) ）處理或不處理（對照）。此外，還以不同的細胞密度接種細菌以模擬不同的 c-di-GMP 水平。在 96 孔板中生長的細菌細胞中的 Cyclic-di-GMP 濃度在沒有任何沉澱、洗滌、裂解或有機提取的情況下進行測量。

c-di-GMP 測定顯示細菌中 c-di-GMP 濃度的變化，以響應抗生素處理和不同細菌細胞密度。

該產(chan) 品被引用於(yu) ：

凝聚素通過控製表型程序對銅綠假單胞菌角膜毒力至關(guan) 重要。趙和等。生物Rxiv。2021。