Stressmarq SMC-401 抗體技術指南

——高特異性α-Synuclein磷酸化抗體(ti) 在神經退行性疾病研究中的應用

一、產(chan) 品核心特性與(yu) 驗證數據

1.1 抗體(ti) 基本信息

靶點：α-Synuclein磷酸化位點（Ser129，pS129）

宿主/亞(ya) 型：小鼠單克隆IgG1

反應物種：人、大鼠、小鼠（經質譜驗證）

1.2 關(guan) 鍵性能參數

參數 SMC-401 常規pS129抗體(ti)

特異性（WB驗證） 僅(jin) 識別pS129 部分交叉反應

靈敏度（IHC） 1:1000稀釋可用 通常需1:500

批間差異（n=5） CV<5% CV 10-15%

1.3 應用場景推薦

最佳適用技術：

✓ 免疫組化（IHC）帕金森病腦切片

✓ 蛋白質印跡（WB）檢測可溶性α-Synuclein

✓ 免疫沉澱（IP）分離病理聚集體(ti)

二、實驗方案優(you) 化指南

2.1 樣本前處理關(guan) 鍵點

組織固定：

4% PFA固定≤24小時（過度固定導致表位掩蔽）

避免酸性脫鈣劑（推薦EDTA脫鈣）

2.2 推薦實驗條件

IHC標準化流程：

複製

1. 抗原修複：檸檬酸鈉緩衝(chong) 液（pH6.0，95℃ 20min）  

2. 封閉：5%驢血清 + 0.3% Triton X-100（室溫1h）  

3. 一抗孵育：SMC-401 1:1000，4℃過夜  

4. 檢測：HRP二抗+DAB顯色（避免金屬增強劑）  

WB優(you) 化方案：

凝膠條件：12% Tris-Glycine凝膠

轉膜：0.2μm PVDF膜，100V 60min

封閉：5% BSA/TBST

三、數據解讀與(yu) 問題排查

3.1 預期結果示例

人腦Lewy小體(ti) 染色：

陽性信號：棕褐色顆粒狀沉積（40×可見）

背景控製：白質區域無染色

3.2 異常結果分析

現象 可能原因 解決(jue) 方案

全片非特異染色 抗原修複過度 縮短修複至10min

無目標條帶（WB） 磷酸酶未被抑製 添加PhosSTOP抑製劑

斑塊染色不完整 組織脫水不充分 延長梯度乙醇脫水時間

四、技術問答（Q&A）

Q1：能否檢測寡聚體(ti) 形式？

需配合 Native-PAGE（避免SDS解聚）

Q2：與(yu) 其他Synuclein抗體(ti) 的區別？

SMC-401特異性：

✓ 不識別非磷酸化α-Synuclein

✓ 與(yu) β/γ-Synuclein無交叉

文檔增強建議：

插入 【Lewy小體(ti) 染色示例圖】 標注典型病理特征

添加 磷酸化驗證方案（Lambda磷酸酶處理對照）

關(guan) 鍵步驟標注 ⚠️警示（如"避免使用酸性脫鈣液"）