Dako S3023 抗體稀釋液科研應用指南

——免疫組化（IHC）與(yu) 免疫熒光（IF）實驗的標準化緩衝(chong) 體(ti) 係

一、產(chan) 品核心特性與(yu) 原理

1.1 化學組成與(yu) 功能

優(you) 化緩衝(chong) 體(ti) 係：

Tris-HCl緩衝(chong) 液（pH 7.2-7.6）維持抗體(ti) 穩定性

蛋白穩定劑（BSA/酪蛋白）減少非特異性結合

防腐劑（ProClin™ 300）抑製微生物生長

關(guan) 鍵優(you) 勢：

降低背景信號 ≥30%（對比PBS）

抗體(ti) 效價(jia) 保持率 >95%（4℃保存1個(ge) 月）

1.2 性能參數對比

參數 Dako S3023 常規PBS 其他商業(ye) 稀釋液

pH穩定性（4-25℃） ±0.1 ±0.3 ±0.2

抗體(ti) 吸附損失率 <8% 15-20% 10-12%

多色IF兼容性 優(you) 秀 中等 良好

1.3 適用場景

推薦應用：

✓ 一抗/二抗稀釋（濃度範圍：0.1-10 μg/mL）

✓ 石蠟/冰凍切片洗滌

✓ 低豐(feng) 度抗原檢測（如磷酸化蛋白）

二、標準化實驗流程

2.1 抗體(ti) 稀釋方案

複製

1. 平衡：S3023室溫放置10分鍾  

2. 稀釋：按1:100-1:1000比例加入抗體(ti) （如抗CD20抗體(ti) ）  

3. 混勻：渦旋3秒（避免氣泡）  

優(you) 化建議：

高背景樣本：添加0.05% Tween-20

敏感檢測：減少稀釋體(ti) 積20%（提高局部抗體(ti) 濃度）

2.2 免疫染色步驟

步驟 S3023優(you) 化方案 傳(chuan) 統方法差異

抗原修複後衝(chong) 洗 用S3023代替PBS（防脫片） PBS可能導致pH波動

二抗孵育 37℃加速20分鍾 25℃需30分鍾

2.3 穩定性數據

開封後：4℃保存3個(ge) 月（無菌分裝）

凍存：-20℃保存2年（避免反複凍融）

三、質量驗證與(yu) 問題排查

3.1 性能驗證案例

案例1：乳腺癌ER檢測（IHC）

結果對比：

複製

S3023組：H-score=185±12，背景DAB值=0.10  

PBS組：H-score=150±18，背景DAB值=0.28  

案例2：神經元標記（多色IF）

信噪比提升：

488nm通道：SNR增加35%

594nm通道：交叉熒光減少22%

3.2 常見問題診斷

現象 可能原因 解決(jue) 方案

染色不均勻 緩衝(chong) 液蒸發導致濃度變化 使用密封濕盒

陽性信號弱 抗體(ti) 過度稀釋 進行梯度測試（1:50-1:500）

組織脫片 衝(chong) 洗液pH突變 全程使用S3023衝(chong) 洗

四、技術問答（Q&A）

Q1：能否用於(yu) 磷酸化抗體(ti) ？

需額外添加磷酸酶抑製劑（如1mM Na3VO4）

Q2：與(yu) 不同品牌抗體(ti) 兼容性？

已驗證兼容：

✓ Abcam

✓ Cell Signaling Technology

✓ Santa Cruz

文檔優(you) 化建議：

插入 【IHC染色對比圖】（S3023 vs PBS）

添加 抗體(ti) 稀釋計算器 二維碼

關(guan) 鍵步驟標注 ⚠️警示（如"避免使用含NaN₃的抗體(ti) "）